樣本中存在溶血、脂血或黃疸現(xiàn)象，會(huì)對(duì)ELISA試劑盒的檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響嗎？?
日期：2025-12-22 15:06:48
樣本中存在溶血、脂血或黃疸，都會(huì)對(duì)ELISA檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生明顯干擾，甚至導(dǎo)致結(jié)果失真，具體影響和原因如下：
1、溶血的干擾
溶血是指紅細(xì)胞破裂，釋放出細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白、酶類、離子等成分。
血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性，而ELISA常用辣根過(guò)氧化物酶（HRP）作為標(biāo)記物，血紅蛋白會(huì)直接催化底物顯色，造成非特異性信號(hào)升高，使檢測(cè)結(jié)果假性偏高。
紅細(xì)胞內(nèi)的其他成分還可能吸附到酶標(biāo)板孔壁，或與抗體發(fā)生非特異性結(jié)合，增加背景噪音，降低檢測(cè)的特異性。
2、脂血的干擾
脂血是樣本中脂質(zhì)（如甘油三酯、膽固醇）含量過(guò)高，表現(xiàn)為樣本渾濁、呈乳白色。
大量脂質(zhì)微粒會(huì)改變樣本的均一性，干擾抗原抗體的特異性結(jié)合，同時(shí)可能在酶標(biāo)板孔壁形成疏水層，阻礙反應(yīng)物的結(jié)合，導(dǎo)致檢測(cè)信號(hào)偏低。
脂質(zhì)還可能包裹目標(biāo)抗原，降低其與抗體的接觸概率，造成結(jié)果假性偏低；部分脂質(zhì)成分也可能引發(fā)非特異性吸附，使背景值升高。
3、黃疸的干擾
黃疸樣本因含有大量膽紅素而呈黃色，膽紅素是一種強(qiáng)還原劑。
對(duì)于以HRP為標(biāo)記物的ELISA，膽紅素會(huì)抑制HRP的酶活性，減少底物的顯色反應(yīng)，導(dǎo)致檢測(cè)信號(hào)降低，結(jié)果假性偏低。
膽紅素本身的顏色也會(huì)干擾吸光度的直接讀取，尤其是當(dāng)檢測(cè)波長(zhǎng)與膽紅素的吸收波長(zhǎng)相近時(shí)，會(huì)造成讀數(shù)誤差。
應(yīng)對(duì)建議：
盡量避免采集、處理過(guò)程中出現(xiàn)溶血（如輕柔操作、避免劇烈震蕩）；
脂血樣本可通過(guò)3000×g離心15–20分鐘去除部分脂質(zhì)，或使用專用的脂蛋白去除試劑盒；
嚴(yán)重黃疸或溶血的樣本建議重新采集；若無(wú)法重采，可參考試劑盒說(shuō)明書(shū)，設(shè)置相應(yīng)的樣本空白或采用校正公式進(jìn)行結(jié)果修正。
